动物常用喹诺酮类抗菌药物分析进展

发布: 2011-05-08 |  作者:  |   来源:

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    喹诺酮为一类具有4一喹诺酮环结构的药物。第一代药物萘啶酸(1962),第二代药物吡哌酸和氟甲喹(1974),抗菌作用较弱,国内较少使用。第j代为氟喹诺酮类(具有6一氟一  

    7一哌嗪一4一诺酮环结构)。喹诺酮类药物结构相似,取代位点较多,抗菌谱较广,活性高,从其结构一活性关系上探索开发新品种己成为喹诺酮类药物的研究热点,因而发展迅速,  

    尤以人药领域的喹诺酮类药物发展为最陕。最近几年又推出了数十种之多的新品种,其中有些还未命名,只给出了试验编号。  

    喹诺酮类药物广泛地用于畜禽的细菌、霉形体病防治,已投人使用或即将进人兽医领域的药物有10多种,主要有两类,一类从人医用移植转化而来,如诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、培氟沙星、洛美沙星等。另一类是动物专用品种,己批准上市的兽医专用喹诺酮类药物有恩诺沙星(德国拜耳公司)、沙拉沙星(美国雅培公司)、单诺沙星(美国辉瑞公司)、二氟沙星(美国雅培公司)、倍诺沙星(日本武田制药),奥比沙星(日本大日本制药)和麻保沙星(瑞士罗氏公司),其中,后三种在我国还未见上市。  

    诺酮类药物与细菌DNA复制所需的DNA一~rase的亚基A(Subunit)结合而抑制DNA复制化,此外由于细菌细胞具有强烈的穿透力,故具有强大的杀菌作用。这些药物的抗菌作用与疗效可与第j代头孢菌素媲美,已成为兽用抗菌药物中最活跃的研究领域之一,随之而来的这类药物的分析分析显得十分重要,相关文章也比较多,但大多数文章,例如彭六保等从四代喹诺酮类药物分类综述了该类药物的分析进展,其针对性不强;还有一些文章,如王玉忠、张加玲等从各种分析方法进行综述,与上面存在同样的问题。所以本文仅对兽医常用的九种喹诺酮类药物分析进展综述,以期对兽药临床及生产具有一定的帮助。现将常用的分析方法方法介绍如下。  

    1恩诺沙星  

    于慧娟等采用反相离子对液相色谱法时测定l1种氟喹诺酮类药物(恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、培氟沙星、沙拉沙星、依诺沙星、单诺沙星、奥比沙星、二氟沙星和麻保沙星)的研究方法,以三氟乙酸为离对子试剂,甲醛一乙腈一三氟乙酸为流动相,用C18柱分离测定11种氟喹诺酮类药物。该方法的优点是利用通用的荧光检测器和等浓度洗脱的方式即可达到同时测定11种氟喹诺酮药物的目的,方法简单、灵敏、重现性好及通用性强。为兽医药行业、养殖行业和食品行业等诸多领域的氟喹诺酮类药物多组分同时检测奠定了基础。而原料药系用高氯酸非水滴定法,其液体制剂系用分光光度法。  

    2沙拉沙星  

    于慧娟等采用反相离子对液相色谱法对沙拉沙星检测,如上所述。沙拉沙星的分析测定方法可分为微生物检定法,高效液相色谱法(HPLC)、紫外分光光度法、荧光分析法。李艳华等综述了FernandesPB等用琼脂扩散生物检定程序,以枯草杆菌或大肠杆菌为检测微生物,进行鼠和鱼体内盐酸沙拉沙星的分析测定。及BauerJF等,SteffenaKI等,HormazabalV等,MeinertzJR等和RovbalJE等分别用HPLC法对鱼血清和组织、牛奶、鱼饲料等的盐酸沙拉沙星的含录进行了测定,HPLC法的灵敏度比生物检定法高得多。而在HPLC法中可以使用紫外检测器和荧光检测器,但后者的灵敏度比前者高2—3个数量级。李达焱等利用紫外分光光度法测定沙拉沙星可溶性粉的含量,和专一性较强的HPLC法相比,紫外分光光度法可作为生产厂家的质量控制方法,用于I陕捷、简便地控制生产过程中检测沙拉沙星的含量。

    3单诺沙星(甲磺酸达氟沙星)  

    卢菁采用高效液相色谱法找出与该方法相适应的流动相,用反相高效液相色谱法测定其含量。李达焱采用旋光法测定单诺沙星的含量,而农业部部颁标准规定用电位滴定法测定单诺沙星含量,电位滴定法操作繁琐,终点难控制。根据单诺沙星有旋光性的特点,采用旋光法测定其含量,操作简单,结果与文献的电位滴定法测定结果基本一致。  

    4二氟沙星  

    农业部发布进口兽药质量标准和新批兽药质量标准规定了盐酸二氟沙星、盐酸二氟沙星片、盐酸二氟沙星粉、盐酸二氟沙星溶液、盐酸二氟沙星注射液分析方法。白琦采用高效液相色谱法测定鸡血浆中二氟沙星的浓度。  

    5诺氟沙星  

    利用流动注射在线过滤稀释一原子吸收分光光度法测定诺氟沙星的含量,沈向忠等利用四苯硼钠与诺氟沙星在酸性条件下按l:l定量生成沉淀的原理,用羟胺盐标准液滴定剩余的四苯硼钠,方法快速、准确。鲁传华等采用电导分析法以氢氧化钾标准溶液为滴定剂,测定了诺氟沙星胶囊的含量,方法独特.Alaas.Amin利用诺氟沙星与2,3一二氯一5,6一氰基对笨醌(DDQ)、7,7,8,8一四氰基苯醌(TCNQ)、对氯醌(cI)、氯冉酸(clA1反应形成荷移络合物,其最大吸收分别为460nin、843nin、550mn、53|nIn,测定了片剂中的诺氟沙星含量,其中以诺氟沙星与TCNQ反应形成的络合物灵敏度最高。AI—Khalnees等利用诺氟沙晕与对醌苯酮反应形成1:1荷移络合物,其存495nm有最大吸收,测定了片剂中的诺氟沙星的含量。张广求等用双波长分光光度法测定栓剂中诺氟沙星的含量。黄林清等用差示扫描电位法测定了诺氟沙星的含量。中国药典采用非水滴定法,操作繁琐,高浓度的冰醋酸对人体有害,研究发现,在合适的酸度条件下,诺氟沙星、Cu2+、磺基水杨酸反应牛成非水溶性的元络合物沉淀。测定滤液中剩余的Cu2可以间接测定诺氟沙星的含量,实验中,以流动注射进样器实现沉淀与滤液的分离,操作简便、快速、采样频率为90h-1。若用于诺氟沙星胶囊的测定,测得结果与药典测定结果比较,经F检验,在置信度为95%,两种方法之间无显著性差异。  

    6环丙沙星  

    有关文献报道以溴甲酚红紫和浪酚蓝为显色剂在可见光区测定环丙沙星,利刚荧光分光光度法灵敏度高、选择性好的优点.以荧光敏化剂结合液相色谱测定了生物样品中的环丙沙星和血清中的环丙沙星等,方法更简单。张兰桐等用差示分光光度法测定环丙沙星乳酸盐片剂含量。有关文献报道了荧光法测定鼠腹膜巨噬细胞内的环丙沙星,王似菊等用荧光法测定了胶囊。王毓中等以0.1mol L-1‘氯化钾溶液作离子强度测节剂,氢氧化钠标准液为滴定剂,采用Cran线性函数进行电位滴定,测定了盐酸环丙沙星原料和片剂含量。李建平等用仵水溶液中,盐酸环丙沙星与荧光桃红形成荷移络合物沉淀,离心分离后,沉淀溶于乙醇中于546nm处测定了片剂中盐酸环丙沙星的含量。凌骝等用微生物法测定了血清巾的环丙沙星,此法常用于新药(如IMB~86001)的抗菌活性抗菌潜研究。但此种方法操作繁琐,费时费力,故一般不常用于喹诺酮类药物的含量测定。如梁耀东等提出在酸性条件下,盐酸环丙沙星对Ce(IV)一Na2SO3微弱化学发光体系具有增敏作用,建立了Fl一化学发光测定盐酸环丙沙星的新方法。此外,还有用于测定该类药物的离子选择性电极法、核磁共振法、质谱法等。何晓英等朋系数倍率法测定复方环丙沙星栓剂的含量。  

    7氧氟沙星  

    王唯红等用溥层色谱一荧光分光光度法(TLC)分离受试着尿液中的氧氟沙星,以荧光光度法测定其含量,计算m氧氟沙星在尿中的排泄速率。喹诺酮类药物能与多种显色剂反应,反应产生的络合物,在呵见光区有良好吸收度。徐庆等利用左氧氟沙星在二甲亚砜一甲醇溶液中与氯化铁生成黄橙色鳌合物,于417nln波长处测定了左氧氟沙星片的含量。有关报道采用配基交换手性添加剂,存ODS柱上对氧氟沙星对映异构体进行手性分离,并对左氧氟沙星注射液中右旋体的含量测定进行研究。色谱条件为Kromasil C18柱(200X4.65mm),流动相为甲醇一L-异亮氨酸硫酸铜溶液(取L-异亮氨酸1.3g和硫酸铜1.0g加水1000mL溶解,加0.1mol L一1的氢氧化钠调节pH3.5)(10:90),柱温为30,检测波长为291nm。右旋体在2.0~18.0μg mL-1的范围内线性良好,平均回收率为98.6%,RSD=0.3。董学芝等研制了一种氧氟沙星PVC膜涂层玻璃电极,用于氧氟沙星注射液及胶囊的含量  

    测定,结果与高效液相色谱法一致,也町用氯仿提取进行测定;Y.M.Isaa等利用氧氟沙星与溴酚蓝(BPB)溴甲酚红紫(SCe)在pH4.0的乙酸盐缓冲溶液和与溴百里酚蓝(BTB)在pH5.7的磷酸盐缓冲溶液中反应生成离子对缔合物,该缔合物可以被氯仿有效的萃取,利用该法测定了片剂中的氧氟沙星。姜俊勇等用一阶导数光谱法测定氧氟沙星软膏的含量。相关报道以差示脉冲极谱法测定了药物和生物体液中的氧氟沙星。  

    8培氟沙星  

    冯琳等用二阶导数光谱法测定培氟沙星片的含量,如陈勇等提出了用极谱法测定甲磺酸培氟沙星的含量;滴定法费时费力,直接紫外法易受干扰,HPLC和荧光法操作较严格。  

    采用流动注射分光光度法测定甲磺酸培氟沙星片的含量。试验中,采用单纯形优化方法摸索体系的最佳条件。该法简单、快速、准确度较高。可成功的用于药物制剂中甲磺酸培氟沙星含量的测定。  

    9洛美沙星  

    曹尔新等报道在所用底液巾洛美沙星在汞电极上有灵敏的导数还原峰。导数峰高与洛美沙星的浓度在一定范围内呈良好线性关系。该法可用丁片剂和尿样中洛美沙星的含量测定。谭峰综合参考文献报道的其测量方法有uv法、分光光度法、原子吸收法和HPLC法,而中国药典未收载洛美沙星定方法。本文利用洛美沙星结构中含有有机胺,在适当酸性条件下,采用萃取分光光度法测定盐酸洛美沙星的含量,它可以与氢离子结合形成胺正离子,与溴甲酚绿(BMG)分子中的磺酸基负离子结合形成离子对缔合物,该缔合物易溶于氯仿而疏于水,经氯仿提取后,在415nm处有最大吸收,可用于定量测定。该法具有简便,快速准确和灵敏度高等优点。用于实际样品测定,获得了满意的结果。  

    综上所述,一方面目前应用高效液相色谱法、核磁共振法、质谱法和毛细管电泳法对喹诺酮类药物进行含量测定的相关文献较多。另一方面,从人用转为兽用的喹诺酮类药物分析方法较多,也较成熟,而兽医专用的喹诺酮类药物分析方法则相关文献较少。所以,我们兽医工作者应借鉴人用喹诺酮类药物成熟的分析检测方法,探索更准确、更易于生产应用的药物分析方法。 
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